| |||||||
Podłożowa książka kucharska FastFreda(FastFred's Media Cookbook)byFastFred & ChesterKarma(v0.97) original text: http://www.shroomery.org/forums/showflat.php/Number/3077006 [ tłumaczenie: cjuchu ]
Spis Tresci: Rozdział A. Ulubione przepisy klasyczneAgar dekstrozowo ziemniaczany (PDA - Potato Dextrose Agar)(FDA M127)200 g naparu z ziemniaków [rozcieńczyć łącznie do 1 litra, ~4g części stałych] By przygotować napar ziemniaczany, ugotuj 200 g wyszorowanych, pokrojonych w plastry (nieobranych) ziemniaków w 1 litrze wody destylowanej przez 30 min. Przefiltruj przez muślin, zachowując płyn, który jest naparem ziemniaczanym (lub zastosuj odwodnioną postać handlową). Zmieszaj z innymi składnikami i zagotuj w celu rozpuszczenia. [Rozcieńcz by otrzymać końcową objętość 1 litra.] Autoklawuj przez 15 minut w 121°C. Odmierz 20-25 ml porcje do sterylnych szalek Petriego 15 x 100 mm. Końcowe pH 5,6 ± 0,2. Podłoże nie powinno być ponownie rozpuszczane więcej niż raz. Podłoże w proszku jest dostępne w handlu lecz może wymagać suplementowania dodatkowym agarem do ostatecznego stężenia 20 g/litr. Do odwodnionego podłoża BBL lub Difco, dodaj 5 g agaru. Wywar jest przejrzysty lub lekko opalizujący i ma żółtawy kolor.1, 2 Agar ziemniaczano dekstrozowo drożdżowy (PDY - Potato Dextrose Yeast)200 g naparu z ziemniaków, [rozcieńcz do 1 l łącznie] Delikatnie gotuj przez dziesięć minut lub aż roztwór będzie klarowny. Agar z ekstraktem słodowym (3%)(MEA - Malt Extract Agar)(Mikrobiologia ogólna)(FDA M93)30 g ekstraktu słodowego Zagotuj by rozpuścić składniki. Unikaj przegrzania, które powoduje zmięknięcie agaru i pociemnienie koloru podłoża. Autoklawuj 15 minut w 121°C. Odmierz po 20-25 ml na sterylne szalki Petriego 15 x 100 mm. Końcowe pH 5,5 ± 0,2. Agar z ekstraktem słodowym i z drożdżami (2%)(MEAY - Malt Extract Agar with Yeast)20 g ekstra jasnego ekstraktu słodowego Dekstrozowy bulion Sabouraud'a i agar (SabDex - Sabouraud's Dextrose Broth and Agar )(FDA M133)40 g dekstrozy Rozpuść całkowicie i rozlej 40 ml porcje do butelek z nakrętką. Końcowe pH 5,8. Autoklawuj 15 minut w 118-121°C. Nie przekraczaj 121°C. Dla dekstrozowego agaru Sabouraud'a, przygotuj bulion jak powyżej i dodaj 15-20 g agaru, w zależności od pożądanej wytrzymałości żelu. Końcowe pH 5,6 ± 0,2. Rozlej do probówek na skosy i do butelek lub kolb do napełniania szalek. Autoklawuj 15 minut w 118-121°C.1 Agar dekstrozowy Sabourauda (SabDex) jest używany do izolowania, hodowli, i utrzymywania saprofitycznych i patogennych drożdży i grzybów. Agar SabDex jest doskonałym substytutem agaru słodowego lub ziemniaczano dekstrozowego, stosowanym przez hodowców grzybów do rozmnażania grzybni grzyba. Agar dekstrozowy Sabourauda został opisany przez Sabourauda w 1892 i wykorzystywany był do identyfikowania grzybów na podstawie ich cech morfologicznych. Agar dekstrozowy Sabourauda jest standardowym podłożem stosowanym do utrzymywania rozwoju drożdży i pleśni. Pokarmowe źródło białka zapewnia w nim pepton, a dekstroza źródło węglowodanów. W wyniku niskiego pH następuje stłumienie bakteryjne. Podłoże to nadaje się szczególnie do podstawowego izolowania grzybów z miejsc normalnie sterylnych, takich jak płyn mózgowordzeniowy. Później, Emmons zmodyfikował to podłoże zmniejszając ilość dekstrozy i ustalając pH na bliższe neutralnego. Modyfikacja ta poprawia sporulację i jest szczególnie użyteczna dla podkultur grzybów, które nie wykształcają struktur owocnikujących na innych podłożach, i tym samym jest użyteczna w ich identyfikacji. Służy ono także jako dobre podłoże utrzymujące dla kultur przechowalniczych.3 Rozdział B. Specjalne mieszanki"Woda Karo" (Bulion z syropu kukurydzianego)1 łyżeczka jasnego syropu kukurydzianego (Syrop Karo lub sklepowy gatunek Jasnego Syropu Kukurydzianego) Dobrze wymieszaj aż do rozpuszczenia, sterylizuj przez 20-30 minut przy 15 psi.17 "Technika dekstrozowa" Podłoże płynne (Bulion z cukru kukurydzianego)1 łyżeczka sproszkowanej dekstrozy (cukier kukurydziany) Woda miodowa (Technika miodowa z Mycotopii)40 g miodu (lub około 1 łyżki na pół litra wody) Właściwą mieszanką dla optymalnych wyników jest wagowo 4% cukrów (miód) i 96% wody. Agar słodowo drożdżowo peptonowy (MYP McKenny)7 g ekstraktu słodowego (sproszkowanego lub syropu) Agar słodowo drożdżowo peptonowy (MYP Stamets'a)20 g ekstrajasnego ekstraktu słodowego Szara tektura (zamiast agaru)Oto szczegółowe kroki do przygotowania płytek tekturowych. Zauważ, że możesz również wykorzystać małe słoiki zamiast szalek Petriego. 1) Odmierz do małego słoika około 100 ml wody kranowej. Agar z płatkami z mąki owsianej75 g płatków z mąki owsianej Mieszaj przez 5-10 minut, następnie odfiltruj większe cząstki poprzez przelanie tego przez jakąś tkaninę, zachowaj bulion. Następnie dodaj agar. Jest to najlepsze podłoże dla Panaeolus cyanescens, jakie kiedykolwiek spotkałem. Uważaj, podłoże to będzie mniej twarde niż inne przepisy więc trzeba dodać więcej agaru by to skompensować.22 Moonflower'a agar ze słodem ryżowym, alfalfa i drożdżami browarnianyminapar z 1 kubka alfalfa, Przygotuj napar stosując średnio 1,5 litra czystej wody. Dodaj alfalfa i ryż, następnie pozwól nasiąkać przez 2 godziny w temperaturze pokojowej sporadycznie mieszając. Przefiltruj lub odcedź przed dodaniem naparu. MycoPsycho'a bulion płynnej kultury grzybni1/2 łyżka słodu (2,5 ml) 1. Przygotuj półlitrowy słoik z pokrywką i pierścieniem a także strzykawkę zarodników. Płynne podłoże Ragadinksa16,5 g dekstrozy Agar amarantusowo sojowy20 g mąki amarantusowej EntheoGenesis nr 44210 g mąki amarantusowej Sterylizuj 20-30 minut przy 15 psi.20 Rozdział C: Przepisy i wariacje na bazie pokarmówAgar z mąki kukurydzianej (CMA - Corn Meal Agar)2 g mąki kukurydzianej, napar z niej (filtrowany) Agar z dekstrozą i mąką kukurydzianą25 g żółtej mąki kukurydzianej Agar z płatkami ziemniaczanymi20,0 g płatków ziemniaczanych Agar ziemniaczano dekstrozowy i agar z płatkami ziemniaczanymi są przepisami opracowanymi do sprzyjania sporulacji grzybów. Ziemniaki zawarte w tych podłożach zapewniają podstawy odżywcze dla bujnego rozwoju grzybów. Oba podłoża zawierają dekstrozę jako stymulator wzrostu. Agar ze skrobią ziemniaczaną30 g skrobi ziemniaczanej, rozpuszczalnej Odczyn jest regulowany po autoklawowaniu by zapobiec hydrolizie agaru przez kwas.20 Agar z płatkami ziemniaczanymi i drożdżami20 g płatków ziemniaczanych Agar ziemniaczano marchwiowy20,0 g tartych ziemniaków Gotuj ziemniaki i marchew w 1000 ml wody przez godzinę, przefiltruj, dodaj wody by uzyskać początkową objętość, wyreguluj pH na 7,0 - 7,1 i dodaj agar. Agar z mąką jęczmienną i ekstraktem słodowym40 g mąki jęczmiennej Sterylizuj 20-30 minut przy 15 psi.21 Agar Sabouraud'a zmodyfikowany mąką jęczmienną25 g mąki jęczmiennej Sterylizuj 20-30 minut przy 15 psi.21 Agar z mąką owsianą (OA - Oatmeal Agar)60,0 g płatków owsianych (przefiltruj) Gotuj płatki 5-10 minut, następnie przefiltruj płyn do kolejnego pojemnika stosując muślin lub metalowe sitko z małymi oczkami. Rozcieńcz płyn do 1 l, dodaj agar, i podgrzej mieszając aż do rozpuszczenia części stałych. Podaje się, że jest to dobre podłoże do uprawy Panaeolus cyanescens.5 Agar z mąką owsianą A20,0 g płatków owsianych pH 7,2.6 Agar z mąką owsianą B30,0 g płatków owsianych Trzymaj płatki w łaźni wodnej w 58°C przez 1 godzinę, przefiltruj przez 2 warstwy gazy rozcieńcz do 1000 ml i dodaj 15 g agaru.6 Agar z mąką owsianą V-850 ml soku V-8 Pamiętaj, aby użyć pojemnika o wiele większego niż objętość podłoża, tj., przygotuj 500 ml podłoże w 2 litrowych kolbach albowiem będzie miało tendencję do kipienia niezależnie od tego jak wolno jest studzone.20 Podłoże V850 ml soku V8 Handlowy sok V8 jest sporadycznie stosowany do kultur tkankowych grzybów jadalnych. Należy zauważyć, że większość grzybów preferuje podłoże w przedziale neutralnym do nieco kwaśnego, to jest, pH o około 5,5 do 6,5. Jednakże grzyb słomowy, Volvariella volvacea preferuje podłoże o wysokim pH 6,8 do 7,8. Dlatego, ważne jest upewnienie się, że kwasowość lub pH podłoża jest poprawne dla określonego grzyba. Należy być tu ostrożnym i zastosować pojemnik o wiele większy niż objętość podłoża, tj., przygotowywać 500 ml podłoża w 2 litrowych kolbach albowiem będzie miało tendencję do kipienia nie ważne jak wolno jest studzone. 20 Agar fasolowy100 g fasoli (groszek lub strączki) [napar z niej (filtrowany)] Przygotuj wywar z fasoli. Sterylizuj w 121°C przez 30 min.6 Agar bobowo dekstrozowy (FDA - Faba Bean Dextrose Agar)200 g nasion bobu lub 400 g liści bobu [napar z nich] Metoda: Podłoże to stosowane jest do rozmnażania B. fabae, A. fabae, oraz A. tenuis.12 Agar grochowy100 g żółtego grochu Agar kapustowy50,0 g kapusty Gotuj 50,0 g kapusty w 1000 ml wody, przefiltruj kapustę, dostosuj objętość wywaru do wartości początkowej.6 Dra Pollock'a Agar zmodyfikowany karmą dla psów10 g suchej karmy dla psów (zmielonych na mąkę) Sterylizuj 20-30 minut przy 15 psi.20 Rozdział D. Inne podłoża i przepisy alternatywneAgar ziemniaczano glukozowy 1200 g tartych ziemniaków Gotuj ziemniaki przez 1 godzinę w 1 litrze wody, przefiltruj przez gazę. Dolej wody by uzyskać objętość początkową, dodaj glukozę i agar. Podłoże ziemniaczano peptonowe200 ml wywaru ziemniaczanego [napar z 200 g ziemniaków] Agar ziemniaczano peptonowo drożdżowy (PPYA - Potato-Peptone-Yeast Agar)200 ml wywaru z ziemniaków [napar z 200 g ziemniaków] pH 8,0.6 Agar Słodowy (MA-Malt Agar)(FDA M185)[aka 2% MEA]20 g ekstraktu słodowego, sproszkowanego Zmieszaj składniki, gotuj do rozpuszczenia agaru i sterylizuj przez 15 minut w 121°C. Ostudź podłoże do 45°C i wlej na szalki w aseptycznych warunkach. Podłoże to jest polecane jako ogólne podłoże do utrzymywania.1 Bulion z Ekstraktem Słodowym Difco (FDA M94)6,0 g bazy ekstraktu słodowego Końcowe pH 4,7 ± 0,2.1 Agar z ekstraktem słodowym dla drożdży i pleśni (MEAYM - Malt Extract Agar for Yeasts and Molds)(FDA M182)20,0 g ekstraktu słodowego, sproszkowanego Wymieszaj składniki, podgrzej by rozpuścić agar i sterylizuj w 121°C przez 15 min. Schłódź podłoże do 45°C i zalej szalki w aseptycznych warunkach. Odwodniony agar słodowy jest dostępny w handlu, lecz ponieważ istnieje kilka przepisów na agar słodowy, sprawdź pod względem właściwego składu. Agar z ekstraktem słodowym i peptonem30 g ekstraktu słodowego Wyreguluj pH na 5,6. Sterylizuj w 121°C przez 10 min.8 Agar Rapera & Thoma z ekstraktem słodowym (RTMEA)Do 2% MEA dodaj: Podłoże ISP 2 (Słód, Drożdże, Glukoza)10,0 g ekstraktu słodowego pH 7,2.6 Agar z ekstraktem drożdżowym (YEA - Yeast Extract Agar)(FDA M181)10,0 g peptonu proteozowego Wyreguluj pH do 7,2-7,4. Autoklawuj w 121°C przez 15 min.1 Agar drożdżowo glukozowy5,0 g ekstraktu drożdżowego pH 7,2. Sterylizuj w 121°C przez 15 min.6 Agar glukozowy z ekstraktem drożdżowym20,0 g glukozy Agar drożdżowo glicerynowy5,0 g ekstraktu drożdżowego Tynktura obornikowa1,0 kg krowiego obornika (świeżego) Zagotuj, przeciśnij przez gazę do butelki i rozcieńcz 3 do 1.6 Agar obornikowy100-125 g obornika końskiego Gotuj obornik w 1000 ml wody przez 10 min, następnie przechowuj przez 16-20 godzin, przefiltruj przez 1-2 warstwy bibuły filtracyjnej, dostosuj do objętości początkowej, dodaj agar. Agar wodny (aka Agar głodowy)20,0 g agaru Sterylizuj w 121°C przez 15 min.6 Agar żelatynowy (FDA M54)4 g peptonu Zrób zawiesinę ze składników, stale mieszając by uniknąć przypalenia żelatyny, i gotuj do rozpuszczenia żelatyny i agaru. Wyreguluj pH na 7,2 ± 0,2. Autoklawuj 15 minut w 121°C. Ostudź do 45-50°C. Wlej na szalki.1 Agar do zliczania drobnoustrojów (aka SMA - Standard Methods Agar)(FDA M124)5,0 g tryptonu Podgrzej do rozpuszczenia składników. Rozlej do odpowiednich probówek lub kolb. Autoklawuj 15 min w 121°C. Końcowe pH 7,0 ± 0,2. Dla żywotnych drożdży i pleśni, rozlej 20-25 ml porcje do sterylnych szalek Petriego 15 x 100 mm.1 Agar odżywczy (FDA M112)3 g ekstraktu wołowego Podgrzej do zagotowania by rozpuścić składniki. Rozlej w probówki lub w kolby. Autoklawuj 15 min w 121°C. Końcowe pH 6,8 ± 0,2.1 Agar skrobiowy (FDA M143)(Agar odżywczy ze skrobią)23 g Agaru odżywczego (FDA M112) Podgrzej by rozpuścić agar w 500 ml wody. Rozpuść skrobię w 250 ml wody. Połącz i rozcieńcz do 1 litra. Autoklawuj 15 min w 121°C. Uwaga: do odwodnionego agaru skrobiowego Difco dodaj 3 g agaru.1 Agar skrobiowo drożdżowy2,0 g ekstraktu drożdżowego pH 7,3.6 Agar skrobiowo drożdżowy 1/50,4 g ekstraktu drożdżowego pH 7,3.6 Podłoże do długotrwałego przechowywania (FDA M85)3 g ekstraktu drożdżowego, 0,3% Podgrzej do rozpuszczenia składników. Rozlej 4 ml porcje do probówek 13 x 100 mm z nakrętką. Autoklawuj 15 min w 121°C. Ostudź i dokręć nakrętki w celu przechowania. Regulowanie pH nie jest konieczne.1 Agar peptonowo mięsny (Mięsna woda)10,0 g peptonu Przygotowanie mięsnej wody: rozdrobnij 500 g mięsa bez kości, tłuszczu i ścięgien, dodaj 1000 ml wody kranowej i pozostaw na 12 h w temperaturze pokojowej lub pod termostatem w 30°C, lub przez 2 h w 37°C. Następnie wyciśnij mięso przez gazę lub materiał i gotuj filtrat przez 5 min. Białka zostaną zdenaturowane. Przefiltruj ostudzoną masę przez bawełniany filtr i dolej wody by otrzymać objętość początkową. pH 7,2 - 7,4. Rozdział E. Powszechne roztworyRoztwór siarczanu gentamycyny (FDA M57)5,00 g siarczanu gentamycyny Wysterylizuj poprzez filtrację przez membranę 0,20 µm. Przechowuj w -20°C.1 Chloramfenikol 0,2g/litr podłoża przetrwa autoklawowanie. Rozdział F. Źródła
[ tłumaczenie: cjuchu ] | |||||||
Odsłon od 25.10.2016
| |||||||